石榴皮鞣花酸提取

从石榴皮及石榴叶中提取鞣花酸生产技术：
通过溶剂法提取得到石榴多酚，
然后用酸或酶水解制备粗鞣花酸，
再经溶剂结晶等技术纯化精制而得鞣花酸产品

# 鞣花酸含量的测定
鞣花酸是一种有机物，化学式为C14H6O8，是一种==多酚二内酯==，是没食子酸的二聚衍生物。
鞣花酸广泛存在于各种软果、坚果等植物组织中的一种天然多酚组分，
鞣花酸具有多种生物活性功能,例如抗氧化功能、抗癌、抗突变性能、对人体免疫缺陷病毒的抑制作用。
除此之外,鞣花酸还是一种有效的凝血剂,对多种细菌、病毒都有很好地抑制作用,能保护创面免受细菌的侵入,防止感染,抑制溃疡。
同时,经研究发现,鞣花酸还具有降压、镇静作用。
1、测定原理
利用鞣花酸的结构特性， 是没食子酸的二聚衍生物，是一种多酚二内酯，呈反式没食子酸单宁结构，有多个共轭双键结构， 在254nm处有最大吸收峰。
2、试样制备
以黑莓为例，取新鲜黑莓叶子于电热恒温干燥箱50℃烘干至恒重，用高速粉碎机粉碎 1min，过孔径 0.28mm 筛后备用。准确称取 5g 黑莓叶粉末，加 40ml 50%乙醇溶液，于超声波中处理 20min 后， 10000 转/分钟离心10min，取上清，沉淀中加入 50ml 50%乙醇溶液按上述步骤重复提取 2 次，合并上清，定容至 200ml。以 0.45µm 滤膜过滤后 4℃保存备用。
3、高效液相色谱条件
色谱柱：ZORBAXSB-C18柱（4.6×250mm，5μm）；流动相：乙腈-1.2%磷酸（18：82），流速1mL/min；温度：30℃；进样量：20μL；检测器：紫外检测器，波长254nm。
4、标准曲线的绘制
鞣花酸标准溶液：准确称取鞣花酸标准品5.0mg，以色谱纯甲醇溶解，并定容至5mL，摇匀，配成浓度为1mg/mL的母液， 4℃保存；
用流动相稀释标准储备液，配制系列浓度的标准工作溶液：5 µg/mL、 10 µg/mL、 20 µg/mL、 50 µg/mL 、100 µg/mL。在上述色谱条件下测定，以峰面积为纵坐标、相应的标准工作溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。鞣花酸标样的高效液相色谱图见下图。

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0.1 mg/ml鞣花酸标准品图谱

5、样品检测与计算
将过滤后的试样溶液在上述色谱条件下测定，用峰面积在标准曲线上计算试样溶液中鞣花酸的浓度。
结果按下式计算：
                                            X= C*V/m*100
式中：
   X—试样中鞣花酸含量，单位为毫克每 100 克（mg/100g） ;
   C—由标准曲线上查出或由直线回归方程求出的样品中鞣花酸的含量，单位为毫克每毫升（mg/mL） ;
   V—试样制备体积，单位为毫升（mL）；
   m—试样的质量（g）。