第三章迷迭香酸的精制与纯化

# 3.1实验试剂
大孔吸附树脂
D201
D301R
X-5
天津市光复精细化工研究所
天津市光复精细化工研究所
天津市光复精细化工研究所
天津市光复精细化工研究所
天津市海光化工有限公司
大孔吸附树脂
大孔吸附树脂
大孔吸附树脂
大孔吸附树脂
大孔吸附树脂
大孔吸附树脂
迷迭香酸标准品
乙醇
AB-8
D101
S-8
天津市海光化工有限公司
天津市海光化工有限公司
NKA-Ⅱ
纯度≥98%
95%，AR
美国西格玛公司
广东西陇化工厂
广东西陇化工厂
广东西陇化工厂
盐酸
AR
AR
AR
AR
AR
AR
乙酸乙酯
石油醚
氯仿
广东西陇化工厂
广东西陇化工厂
正丁醇
丙酮
广东西陇化工厂
广东西陇化工厂
# 3.2实验设备
日本岛津公司
紫外可见分光光度计
无机陶瓷膜过滤设备
旋转蒸发器
UV-2550
合肥世杰膜工程有限责任公司
上海亚荣生化仪器厂
RE-52A
郑州长城科工贸有限公司
梅特勒一托利多仪器有限公司
循环水式多用真空泵
电子分析天平
SHB-ⅢI
METTLER AE 240
高效液相色谱仪
# 3.3实验方法
Agilent -1100
美国安捷伦公司
目前从迷迭香中提取高纯度迷迭香酸的研究方法主要有色谱分离法和大孔树脂吸附法，前者难以实现工业化，后者要求料液比较纯净。
本文选用无机陶瓷膜对浸提液进行澄清处理，用大孔树脂对迷迭香酸进行富集，用溶剂萃取法进行进一步纯化得到迷迭香酸产品。
## 3.3.1无机陶瓷膜对浸提液的处理
膜分离技术是近年国际上发展迅速的高新技术之一，已经在化工、食品、医药、环保等行业的分离、浓缩、提纯过程中显示出突出的优势和广阔的前景。
膜分离技术是以膜两侧的压力差为推动力，利用膜的筛分效应对液料体系中的细微颗粒、悬浮杂质、难溶性大分子蛋白质、果胶、多糖等与料液中的有效成分或功能成分实现分离而达到澄清的目的，具有高效、过程无相变、工艺简单、设备占用空间小、易于实现自动化、连续化生产等优点。无机微滤膜因其耐高温、抗腐蚀等独特的优势而在中药水提液澄清方面的应用前景十分广阔。
迷迭香酸浸提液中含有大量细微颗粒、悬浮杂质、难溶性大分子蛋白质、果胶、多糖等杂质，选择用滤布粗滤后再用无机膜对浸提液进行处理，提高迷迭香酸浸提液的澄清度和存储稳定性，有利于下一步的精制与纯化。
## 3.3.2大孔树脂吸附法富集迷迭香酸
### 3.3.2.1大孔吸附树脂预处理和再生
树脂的预处理：
将树脂用95%乙醇浸泡24h使充分溶胀。分别将树脂装入吸附柱，95%的乙醇淋洗至流出液加水不出现白色沉淀为止。再用去离子水冲洗至无醇味即可。装柱：将柱管垂直安装，先将下端活塞关闭，预先将100mL蒸馏水罐入柱内，使过滤面下面的“死气体”没有气泡。再将树脂与蒸馏水混合搅拌均匀，边搅拌边导入柱中，用蒸馏水将装过树脂的烧杯洗净，倒入柱中。待自然沉降后，打开下端活塞，接受流出液。待柱内树脂均匀，不留气泡，表面齐平，蒸馏水液面离树脂平面为1cm左右时，关闭下端活塞。
再生：
用95%的乙醇洗脱至无色时，树脂柱即已再生，然后以大量水洗去醇，即可进行下一次的提取分离。经反复使用后，吸附树脂颜色变深，吸附效果下降时，可用0.01%~1molL"NaOH(或HCl) 洗涤或浸泡适当时间， 至树脂接近原颜色为宜， 继而用蒸馏水洗至中性即可再用。
### 3.3.2.2提取液中迷迭香酸浓度的表示
为了简化检测方法，对迷迭香酸标准品进行了紫外可见光扫描，发现迷迭香酸在紫外光区共有两个吸收峰分别在280nm和322nm，而提取液中主要杂质鞣质的最大吸收峰也在280nm，对实验的准确度有较大影响。
根据朗伯-比耳定律：A=bc可知，本文可选择322nm处的吸光度值来表示迷迭香酸的浓度。
5
4
3
2
0
94004500055
550
200
250
300
350
入/nm
图3-1迷迭香酸标准品紫外一可见光扫描图
Fig.3-1 Ultraviolet spectrogram of rosmarin ic acid
### 3.3.2.3静态吸附实验
用紫外分光光度计分别测出树脂吸附膜透过液前后的吸光度，计算树脂的吸附率和
解吸率[41]
“。
X%-Co-c，) *100%=(Ao-A，)
一
-×100%
(3-1)
(3-2)
C、
A。
C>
he
Y%=c.-c*10%
-×100%=
Tx100%
A。-A，)
式中：C。和C， 分别为吸附前和吸附后溶液浓度(mgm L'") ， C， 为解吸液的浓度(mgm L'") ， A， 和Ar分别为吸附前和吸附后溶液的吸光度， An为解吸溶液的吸光度，X%为吸附率，Y%为解吸率。
### 3.3.2.4动态吸附实验
采用不同的流速将原料液上柱吸附，分段收集流出液，检测流出液的吸光度变化，绘制吸附曲线，以选择适宜的吸附流速；以一定流速，不断加入原料液，监测流出液的吸光度值的变化，直到树脂吸附饱和，停止加入原料液，绘制穿透曲线，计算树脂的动态吸附量。
### 3.3.2.5动态洗脱实验
先用水洗脱杂质，然后分别用不同浓度的洗脱液对吸附饱和的吸附柱进行梯度洗脱，分段收集洗脱液，用紫外分光光度计检测洗脱液的吸光度值，绘制脱附曲线，以确
定适宜的洗脱溶剂和洗脱方法。
### 3.3.3迷迭香酸产品的精制
溶剂萃取法是以分配定律为基础，利用混合物中的各成分在两种互不相溶的溶剂中，分配系数不同而实现的分离目的，通过萃取，能从固体或液体混合物中提取出所需要的化合物。经常用于萃取的溶剂有乙醚、氯仿、二硫化碳、丙酮、乙酸乙酯、各种醇和水。
本文探索用溶剂萃取法纯化迷迭香酸，通过实验选择合适的萃取溶剂并确定萃取剂用量、萃取时间、料液初始浓度等因素。
### 3.3.4迷迭香酸产品的纯化
结晶是制备纯物质的有效方法，溶液中的溶质在一定条件下按分子有规则的排列而结晶成晶体，通常只有同类分子或离子才能排列成晶体，所以结晶过程有很好的选择性。通过结晶，溶液中的大部分杂质会留在母液中，过滤，洗涤就可得到纯度高的产品。
溶液浓度等于溶质溶解度时，该溶液称为饱和溶液，溶质在饱和溶液中不能析出。出。
形成过饱和溶液的方法有：冷却法，蒸发法，真空蒸发冷却法，化学反应结晶法，盐析法。
本文采用结晶法对迷迭香酸精品进行纯化试验。
### 3.3.5迷迭香酸产品的定量分析
实验采用HPLC法对迷迭香酸产品进行定量分析。
# 3.4结果与讨论
## 3.4.1微滤膜对浸提液的预处理
膜孔径的选择对选用微滤膜进行浸提液的处理至关重要，选择用滤布粗滤再用无机膜对浸提液进行处理，对比采用过滤澄清及选用0.4m膜和0.2um膜微滤的处理效果如表3-1。
表3-1不同滤孔对澄清效果的影响
Tab.3-1 The effect of clarification by different method
滤液颜色
滤液体积
9.5%乙醇
/mL
静置时间
效果
澄清方法
/mL
/h
过滤
棕褐色
棕红色
棕黄色
10
10
10
40
40
40
24
24
有絮状沉淀
有絮状沉淀
澄清透明
0.4pm膜微滤
0.2μm膜微滤
24
由表3-1可知，采用微滤可除去悬浮颗粒及大部分的果胶、蛋白，微滤后的透过液澄清透明，颜色比较浅，放置时间长，并且0.2um膜微滤的效果好于0.4um膜微滤的效果。选择0.2um膜进行微滤，达到了滤液澄清的目的，为后面的纯化处理打下了基础。
## 3.4.2大孔树脂吸附法富集迷迭香酸
### 3.4.2.1树脂类型的选择
准确称取用滤纸吸干经过预处理的树脂各3.0g，装人250mL具塞磨口三角瓶中，精密加入初始吸光度A322为93.4的迷迭香酸提取液20mL，置恒温震荡摇床上，振荡频率为120rmin'， 振荡24h， 充分吸附后， 过滤， 测定滤液的吸光度值。由公式(3-1) 计算吸
附率。
取上述吸附过滤后的树脂，加入95%的乙醇溶液30mL，置恒温震荡摇床上振荡24h，过滤，测定滤液的吸光度，由公式(3-2)计算解吸率，实验结果如表3-2。
表3-2迷迭香酸溶液在树脂上的静态吸附
Tab.3-2 The static absorption of rosmarin ic acid solution on resin
树脂型号
X-5
非极性
88.31
D201
D101
非极性
89.85
68.68
D301
中极性
100
AB-8
S-8
聚酰胺
极性
NKA-2
极性
吸附率/%
解吸率/%
极性
91.23
弱极性
86.63
63.4
极性
97.54
17.49
极性
71.05
19.33
55.35
68.34
10.56
10.98
89.25
由表3-2可见，X-5对迷迭香酸的吸附率虽然不是最大，但它的解吸率最高，D301和S-8虽然吸附率很大但很难解吸，从吸附率和解吸率综合考虑，X-5是一种较为理想的富集树脂，因此选择X-5树脂进行富集迷迭香酸。
### 3.4.2.2流速对吸附的影响
各取135g处理过的所选的X-5树脂湿法装柱，以初始吸光度A322为93.4的迷迭香膜过滤液上柱，通过恒流泵调节不同上柱速率，收集流出液，测定流出液在322nm处的吸光度，考察上柱速率对树脂吸附性能的影响。本文主要考察四个流速对吸附的影响：
2mLmin'l， 4mLmin"， 6mLminl， 8mL·min'。实验结果如表3-3所示。
表3-3流速对吸附效果的影响
Tab.3-3 The velocity of flow on the effect of absorption
吸附体积流速
/mL·min
2
吸附量
/mL
1560
1500
1380
6
8
1120
由表3-3可以看出，其动态吸附量随流速的增加而降低，流速过大，使树脂的吸附量下降，提早泄露，流速太小，吸附时间延长，生产效率低，同时使树脂的再生困难，树脂的使用寿命缩短， 综合上述结果， 选择为吸附流速4mLmin 1。
### 3.4.2.3吸附容量，穿透曲线
采用恒流泵控制流速为4mLminl， 将膜过滤后迷迭香料液通过装有135g树脂的玻璃柱中吸附，分段收集，测定流出液在322nm处的吸光度，直至流出液在322nm处吸光度值为原料液吸光度值的10%时，即认为树脂吸附饱和，停止加入原料液，绘制穿透曲线，如图3-2。
m
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
300
800
1300
1800
2300
2800
V/mL
图3-2X-5树脂吸附的穿透曲线
Fig.3-2 The curve of absorption with X-5
从图3-2中可以看出，流出液体积为1.5L时，透过液吸光度已达原液10%，此后穿透曲线斜率急剧增大，说明此点为X-5树脂吸附迷迭香酸的穿透点。
### 3.4.2.4洗脱溶剂的选择
常用的洗脱溶剂有水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。取静态吸附迷迭香酸达饱和的树脂3g，用20mL的洗脱剂恒温震荡至洗脱达到平衡，测定洗脱液在322nm处的吸光度值，计算洗脱率。洗脱溶剂对迷迭香酸的洗脱效果如表3-4。
表3-4几种洗脱剂对迷迭香酸洗脱效果比较
Tab.3-4 The compare of elution solution on the effect of rosmarin ic acid
洗脱剂
蒸馏水
甲醇
乙醇
正丁醇
60.9
丙酮
乙酸乙酯
洗脱率/%A322
93.75
89.25
53.3
40.23
4
从表3-4可知，甲醇和乙醇对迷迭香酸具有良好的洗脱能力，蒸馏水对迷迭香酸的洗脱能力最差，乙醇洗脱迷迭香酸的能力比甲醇稍微弱些。由于天然产物的提取纯化一般应考虑到有机溶剂对药剂和环境的污染，因此本文采用乙醇溶液作洗脱溶剂。
3.4.2.5洗脱乙醇浓度的选择
分别采用不同浓度的乙醇作为洗脱剂， 在4mLmin的流速下对吸附饱和的树脂柱进行洗脱实验，测定洗脱液在322nm处的吸光度值，由公式(3-2)计算迷迭香酸的洗脱率，比较不同浓度的乙醇对迷迭香酸洗脱率的影响如图3-3。
100
一
80
60
40
20
0
0
20
40
60
80
100
Concentration of ethanol/%
图3-3不同浓度乙醇水溶液对迷迭香酸的洗脱效果
Fig.3-3 The concentration of ethanol on the elution effect of rosmarin ic acid
从图3-3可以看出，乙醇浓度对迷迭香酸的解吸有一定的影响，在一定范围，随着乙醇浓度的增加其解吸率也随着提高。当乙醇浓度为45%时，其解吸率只有62.47%，当乙醇浓度增加到75%时，解吸率增加到了89.25%，继续增加乙醇浓度解吸率也逐渐增加，但变化不是很明显，且乙醇浓度过高，增加成本，挥发性也增大，生产操作较难控制。所以，宜选用75%左右的乙醇作为洗脱剂。
3.4.2.6解吸曲线
用一个柱体积的蒸馏水冲洗柱， 再用75%的乙醇直接洗脱， 流速为4mL·min l， 分段收集流出液，测定流出液在322nm处的吸光度，绘制解吸曲线如图3-4。
90
14000
oc oao
12000
10000
8000
6000
4000
2000
-A-4
0
0

2000
0
500
1000
1500
V/mL
图3-4解吸曲线
Fig.3-4 The curve of desorption
由图3-4可知，用75%的乙醇洗脱，洗脱峰比较集中，随着洗脱液体积的增加，迷迭香酸的解吸率逐渐增大，当洗脱体积为1300mL时，解吸率达到86.7%，洗脱体积大于1300mL后，解吸率增长缓慢，从节约试剂和减少能耗等方面考虑当洗脱体积为1300mL时，基本上可以将迷迭香酸洗脱下来。
## 3.4.3迷迭香酸产品的精制
### 3.4.3.1萃取溶剂的选择
经常用于萃取的溶剂是石油醚、氯仿、丙酮、乙酸乙酯、各种醇和水。石油醚为亲脂性溶剂，氯仿、乙酸乙酯和正丁醇为中等极性溶剂，丙酮、乙醇、甲醇、水为亲水类溶剂。本工艺选择乙酸乙酯、氯仿、石油醚和正丁醇为萃取剂，来考察不同萃取剂对迷迭香酸萃取效果的影响。
分别取30ml富集后浓缩液(初始吸光度A322为1192.5)于4个分液漏斗中，依次加入相同体积的乙酸乙酯、氯仿、石油醚和正丁醇作为萃取剂，进行萃取，测定萃取剩余液的吸光度值，萃取效果如表3-5所示。
表3-5萃取剂的选择
Tab.3-5 The selection of extraction solvent
萃取剂名称
乙酸乙酯
1192.5
30
氯仿
1192.5
30
石油醚
正丁醇
1192.5
原液浓度(A322)
1192.5
”m
30
原液体积/mL
30
30
萃取剂体积/mL
30
30
30
剩余液浓度(A322)
1128.6
5.36
1173.6
1.58
707.8
40.65
928.8
22.11
萃取率/%
由表3-5可以看出正丁醇对迷迭香酸的萃取率最高，氯仿和石油醚的萃取率则较低，根据相似相溶的原理，极性物质易溶于极性溶剂，这也是与其化学结构相吻合的。
3.4.3.2正丁醇用量的影响
分别取30mL富集后料液(初始吸光度A322为1192.5)于5个分液漏斗中，依次加入体积为15mL，30mL，45mL，60mL，75mL的正丁醇溶液进行萃取，萃取一次，测定萃取剩余液的吸光度值计算萃取率，来确定萃取剂的最佳用量。
60
55
ocx
50
45
40
35
30
0
15
30
45
60
75
90
Quantity of normal butanol/mL
图3-5正丁酵用量对萃取率的影响
Fig.3-5 The effect of quantity of normal butanol on extracting ratio
由图3-5可知，随着萃取溶剂的增加，萃取率亦不断增加，但当料液比为1：1.5后，萃取率增加缓慢。原因是萃取剂用量少，有效成分未能得到充分提取，从节约成本等方面考虑所以选择正丁醇的用量为浓缩液体积的1.5倍。
### 3.4.3.3料液pH值对萃取效果的影响
由迷迭香酸的结构知道，它具有明显酸碱性的特性。分别取30mL富集后料液(初始吸光度A322为1192.5)于6个分液漏斗中，分别用1：1的盐酸调节溶液的pH值为1，2，3，4，5，6，然后加入45mL的正丁醇溶液进行萃取，萃取一次，测定萃取剩余液的吸光度值计算萃取率。考察溶液的pH值的不同对萃取率的影响，如图3-6所示。
55
oex
50
45
40

0
2
3
4
5
6
pH value
图3-6溶液pH值对萃取率的影响
Fig.3-6 The effect of pH value of solution on extracting ratio
由图3-6可知，料液的pH值为3.0时，迷迭香酸的萃取率最高，pH值为1.0时的萃取率反而低，可能是酸性太强在一定程度上破坏了迷迭香酸的结构。pH值>3.0后，随着溶液pH值的增大，萃取率又开始降低，所以最终选择料液的pH值为3.0.
### 3.4.3.4萃取时间的选择
分别取30mL经大孔树脂富集后的初始吸光度A322为1192.5的迷迭香酸料液于6个分液漏斗中，然后加入45mL的正丁醇溶液，用1：1的盐酸调料液pH值为3.0，进行萃取， 萃取时间分别为5min， 10min， 15min， 20min， 25min， 30min， 测定萃取剩余液
的吸光度值计算萃取率，确定最优萃取时间。
53
52
ox
51
50
49
48
47
5
10
15
20
25
30
T/min
图3-7萃取时间对萃取率的影响
Fig.3-7 The effect of mixed time on the extracting ratio
由图3-7可见， 萃取率随着混合时间的增长而增大。在超过20min后萃取率增长缓慢，
所以最终选择萃取时间为20min。
### 3.4.3.5料液初始浓度的影响
分别取不同固含量的料液30mL，加入45mL正丁醇，用1：1的盐酸调溶液的pH值为3.0， 萃取时间为20min， 萃取两次， 测定萃取剩余液的吸光度值计算萃取率， 考察料液的初始浓度及萃取次数对萃取率的影响，表3-6所示.
表3-6料液浓度对产品纯度的影响
Tab.3-6Infl.of the concentration of concentrated liquid on the product purity
萃取剂用
二次萃取剩余
二次萃
固含量
料液
一次萃取剩
一次萃取
液A322
取率/%
/%
A322
量V/mL
余液A322
率/%
100
4.76
7.14
397.3
45
0
0
100
100
100
100
596.2
795.1
993.7
45
45
45
0
100
0
9.53
11.91
198.8
372.1
74.96
62.55
0
0

迷香中迷达香酸的提取
化及
是取物活性测定的研究
由表3-6可知，随着浓缩液固含量的增加，一次萃取率逐渐降低，固含量为14.29%时，一次萃取率可达到52.99%，固含量小于7.14%时，一次萃取基本完全，固含量太低，制得相同数量的迷迭香酸，萃取剂用量大；固含量越高，萃取级数越多，致使生产周期
长，萃取溶剂损耗多，因此选择固含量控制在14.29%左右时，萃取两次基本完全。
## 3.4.4迷迭香酸精品的纯化
将萃取液合并，减压回收溶剂，真空干燥，得迷迭香酸产品P1-1。称取10g产品P1.1用水溶解，过滤，滤液用1：1的盐酸调pH值至2.0~2.5，以10：6(v/v)的萃取料液溶剂比，用乙酸乙酯萃取3次。合并萃取液，减压回收溶剂，浓缩至适当体积后，低温放置，析
出颗粒状迷迭香酸，过滤，真空干燥得产品P1-2，称重为6g，产率为60%。
## 3.4.5迷迭香酸产品的定量分析
### 3.4.5.1迷迭香提取物中迷迭香酸的定量——HPLC法
高效液相色谱(HPLC) 法分析迷迭香酸的含量：
乙酸水溶液的比例为45：55；色谱条件流动相-------甲醇和0.1%冰
采用等度洗脱， 流速为1.0mLmin'； 色谱柱——Hyper silODSC1s柱(04.0mmx250mm， jm 5) ； 柱温-30℃；波长-—330nm。
标准溶液配制：标准品称样11.8mg，2mL甲醇溶解，然后水定容到50mL，浓度为0.236mgm L·l标准曲线的绘制：进样体积分别取2.5pL(0.59ug)、5pL(1.18ug)、10uL(2.36ug)、15pL(3.54ug)、20pL(4.72pg)，每个点进样3次，记录紫外吸收峰面积，如图表3-7。
表3-7迷迭香酸的HPLC标准曲线数据表
Tab.3-7 The data for HPLC standard curve of rosmarin ic acid
进样量
峰面积
0.59pg
1.18pg
1303.2
2691.35

2.36pg
3.54pg
4.72pg
5519.85
8352.515
11182.35
以样品量(ug)为x值，以峰面积为y值，求标准曲线方程。得到标准曲线的公式为：
y=2394.2x-122.94
(3-3)
31

迷选香中迷迭香酸的提取纯化及提取物活性测定的研究相关系数R=1.0000，
证明进样量与峰面积具有很好的相关性。
14000
12000
10000
8000
6000
4000
2000
0
0
2
3
4
5
6
Q/ug
图3-8迷迭香酸的HPLC标准曲线
Fig.3-8TheHPLC standard curve of rosmarin ic acid
3.4.5.2迷迭香酸产品的HPLC分析
在上述色谱条件下分别进样，测得标准品和迷迭香提取物的保留时间，比较二者的异同。迷迭香酸标准品和实验制备迷迭香酸产品的高效液相色谱图分别如下：
mAU
160
140
120
100
80
60
40
20
0
0
2
6
8
10
m
图3-9迷迭香酸标准品的高效液相色谱图
Fig.3-9HPLC chromatogram of of rosmarin ic acid in a standar sample

32

迷迭香中迷迭酸的提取纯化及提取物活性测定的研究
WD1A衣长*330mm(GYWWDXD00036D)
mAU
500
400
300
200
100
一.
排
NN一
图
3-10
10
迷迭香酸产品的高效液相色谱图
Fig.3-10TheHPLC chromatogram of rosmarin ic acid in P 1-2
由图3-9， 3-10可知， 迷迭香酸标准品的保留时间为5.647min， P 1.2的保留时间为5.884min， 两者相差0.237min， 可能是由于两次测定不是同时测定的， 致使保留时间存在一定的差异。但根据工艺条件及路线，可以判断产品P1-2中主要成分为迷迭香酸。
①产品P1-1中迷迭香酸的含量计算：
进试样10uL，峰面积35885.8，由公式(3-3)计算
y=2394.2x-122.94
x=15.04pg
15.04me=1.504pg·pL
试样浓度为
10uL
1.504pg·pL×25mL
51.3mg
=x100%=73.29%
即P1.1中迷迭香酸的含量为
②产品P1-2中迷迭香酸含量的计算：
进试样2pL，峰面积6591.2，由公式(3-3)计算

y=2394.2x-122.94
x=2.804pg
2.804pg=1.402pg·pL
试样浓度为
2ul
1.402ug·pL×25mL
36.2mg
即P1.2中迷迭香酸的含量为
-x100%=96.82%
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迷迭香中迷选香酸的提取纯化及提取物活性测定的研究HPLC的分析结果表明， 迷迭香酸产品P 1-1经进一步纯化， 其迷迭香酸的含量由73.29%提高到96.82%，纯化效果明显。
# 3.5小结
本章通过对迷迭香酸纯化工艺的试验研究得到以下结论：
## (l)选用0.2um陶瓷膜进行微滤
透过液澄清、透亮，可除去悬浮颗粒及大部分的果胶、蛋白，料液不易霉变，放置时间长，达到了提取液除杂澄清的目的。
## (2)微滤后的提取液用大孔树脂进行富集
结果表明X-5树脂对迷迭香酸具有较好的吸附和解吸能力。最佳工艺条件为：控制流速为4mLmin'， 上样量为1500mL， 用1300mL75%酒精进行洗脱。在此最佳工艺条件下，达到了较好的分离富集效果。
## (3)正丁烷萃取
调节富集后的浓缩液固含量为14.29%左右，
用1：1的盐酸调溶液的pH值为3.0，选用正丁醇为萃取剂， 用量为富集后料液体积的1.5倍， 萃取时间为20min， 萃取两次，对迷迭香酸的萃取已基本完全。回收正丁醇，可得纯度为73.29%的迷迭香酸产品P1-1。
## (4) 乙酸乙酯萃取
将产品P1-1用水溶解，
用1：1的盐酸调pH值至2.0~2.5，以10：6(v/v)的萃取料液溶剂比，用乙酸乙酯萃取3次。
合并萃取液，减压回收溶剂，
浓缩至适当体积，
## 低温放置，析出颗粒状迷迭香酸
## 过滤，
## 真空干燥

得产品P1-2，纯度为96.82%，产率为60%。